عنوان انگلیسی مقاله: Fluorescence microscopy
عنوان فارسی مقاله: میکروسکوپ فلورسانت
فرمت فایل ترجمه شده: فایل Word ورد 2007 یا 2003 (Docx یا Doc) قابل ویرایش
تعداد صفحات فایل ترجمه شده: 27
_______________________________________
چکیده
با
وجود اینکه میکروسکوپ فلورسانس به تمام بیولوژی مولکولی و سلول نفوذ می
کند، اما اکثر بیولوژیست ها تجربیات کمی در مورد پدیده فوتوفیزیکی اصلی
دارند. درک اصول میکروسکوپ فلورسانس زمانی مفید است که در جهت رفع مشکلات
تصویربرداری باشد. علاوه بر این، میکروسکوپ فلورسانس با تکنیک ها، ردیاب
های جدید و ابزارهایی که تقریبا هر روز در حال ظهور هستند، به سرعت سیر
تکامل خود را می پیماید. آشنایی با فلورسانس شرط لازم استفاده از بسیاری از
این پیشرفت ها می باشد. در این مقاله تلاش شده است که چهارچوبی از درک
برانگیختگی و انتشار اشعه توسط فلوروفورها، روش کار میکروسکوپ های فلورسانس
و برخی از روش های بهینه سازی فلورسانس ارائه شود. بسیاری
از پیشرفت های تکنیکی میکروسکوپ ها در طی سالهای متمادی بر افزایش تضاد و
کنتراست بین چیزی که جالب توجه است (سیگنال) و چیزی که جالب توجه نیست (زمینه) متمرکز بوده است. میکروسکوپ فلورسانس یک نمونه اصلی است. بطوریکه
هدف آن آشکارسازی اشیاء و موارد مربوطه در یک زمینه سیاه متضاد می باشد.
به دلیل انتخاب پذیری ذاتی این میکروسکوپ، تصویربرداری مهمترین کمکی است که
این میکروسکوپ به بیولوژی کرده است. در طی چند دهه گذشته، شیمیدان های آلی
هزاران ردیاب فلورسانت درست کرده اند که ابزار لیبل گذاری واقعی هر یک از
جنبه های قابل تصویر برداری سیستم های بیولوژیکی را فراهم می کنند. برای
نمونه، کتاب راهنمای ردیاب های مولکولی (Molecular Probes Handbook) که
بزرگترین خلاصه کاربردهای فلورسانس برای بیولوژیست ها است در ویرایش دهم
آنلاین خود (probes. invitrogen. com/handbook) شامل 13 فصل می باشد
که در 14 فصل به توصیف 3000 یا بیشتر ردیاب فلورسانت برای تعداد زیادی
سئوالات بیولوژیکی سلول پرداخته شده است. گستره طیفی زیادی از فلوروفورهای
موجود امکان تصویربرداری همزمان اجزاء مولکولی یا زیرسلولی، و سلولی متفاوت
را فراهم می کند. علاوه بر این، همکاری مشترک فرآورده های ژنی فلورسانت،
برجسته ترین پروتئین فلورسانت سبز (GFP) و متغیرهای آن این امکان را به
بیولوژیست های مولکولی داده است تا اجزاء پروتئین سیستم های زنده را از نظر
ژنتیکی مشخص کنند (tag) و در یک دوره جدید برای فلورسانس آغاز کنند.
نهایتا، پیشرفت سریع نوآوریها در زمینه اسکن لیزری میکروسکوپ های دو- فوتونی
و هم کانون نشان می دهد که روش هایی فلورسانس در حال حاضر روش قدرتمندی را
برای مشاهده ساختارهای میکروسکوپی سه بعدی حتی به صورت عمقی در بافت ها
فراهم می آورد. بنا به همین دلایل، انجام بیولوژی مولکولی یا سلولی بدون
درک پایه و اساس فلورسانس کار مشکلی است و این روند رو به پیشرفت است.